? Bodem is een rijke bron van veel verschillende soorten bacteriën . Bacteriën helpen bij het ontbindend plantaardig en dierlijk organisch materiaal , bij de vaststelling van anorganische elementen en in de interactie met plantenwortels en bodemdeeltjes . Zelfs in een kleine bodemmonster , zoals vervat in een eetlepel , zijn er miljoenen individuele bacteriën aanwezig . De taak isoleren van individuele bacteriën aan het bodemmonster verdunnen met bacteriële concentratie laag genoeg dat een enkele bacterie kan worden gescheiden van anderen en kan in een zuivere kolonie groeien op nutriënt agar . Wat je nodig hebt
trypticasesoja bouillon
5 ml reageerbuizen , gesteriliseerd en afgedekt
Steriele houten ijsstokjes
Wax markering potlood en Reageerbuisrek Briefpapier handdoeken
Bleach ( 10 procent oplossing ) op bunsenbrander
Wedstrijden
Entogen
trypticasesoja agar
Petri platen
Incubator
Koelkast
Toon meer instructies
grondmonster
1 Test buizen worden gebruikt voor het verdunnen van bodemmonsters .

vernietiging van een kurk steriele reageerbuis containg 5 ml voedingsoplossing trypticasesoja bouillon . Kies een steriele stokje . Kopen van 2 Gebruik een steriele stokje aan de bodem te verzamelen .

Ga naar buiten en het verzamelen van een kleine bodemmonster met de punt van het stokje , met behulp van steriele techniek , een methode om ervoor te zorgen het monster niet besmet , en de gebruiker is niet besmet .
3

Haal het beschermkapje van de reageerbuis en voeg de bodem om de voedingsstof bouillon in de reageerbuis . Meng de bodem in de bouillon met het stokje . Bedek de reageerbuis met de dop . Schrijf de uiterste datum van collectie locatie aan de kant van de reageerbuis met de wax markering potlood.

Zet 4 de reageerbuis in een reageerbuis rek voor ongeveer 30 minuten totdat de bodem om zich te vestigen aan de bodem .
inoculeren Petrischaaltje
5

Ontsmet het werkoppervlak door het schoonmaken van het met 10 procent bleekwater oplossing en papieren handdoeken .
6

Zet de petrischaal zodat de onderkant deksel met de agar is up . Trek een T op de bodem deksel , met de dwarsbalk van de T afscheiden van het bovenste derde van het deksel en de stam van de T verdelen van de onderste twee derde in de helft .
7 Gebruik een bunsenbrander aan vlammen entnaalden .

Schakel en licht de bunsenbrander . Vlam de enting lus over de bunsenbrander vlam .
8

Haal het beschermkapje van de reageerbuis en raak de lus om de bovenste laag van duidelijker vloeistof. Trek de lus en opnieuw betrekking op de reageerbuis .
De T - Streak Methode
9 Maak een zigzag streep meer dan een derde van de schotel .

Gebruik de dwarsbalk van de T u hebt getekend op de achterkant van de onderste deksel als referentiepunt . Raak de entnaald aan een zijde van de ruimte boven de T lat en teken de tip over het oppervlak van de agar-agar in een zigzag lijn , eindigt de lijn aan de andere kant van de ruimte .
10

Verwijder de entnaald en sluit de petrischaal . Vlam de lus in de bunsenbrander , en laat het even afkoelen. Open de petrischaal en raak de lus om een plek in de buurt van het einde van de reeds door de lus getekende lijn . Maak nog een zigzag lijn haaks op de eerste regel , die de eerste ruimte onder de T lat en aan een kant van de stengel .
11

Verwijder de lus en sluit de petrischaal . De öse weer , open de petrischaal , en raak de enigszins afgekoelde lus naar de tweede lijn in de buurt van het einde. Teken nog een zigzag lijn loodrecht op de tweede regel in de resterende open ruimte op de petrischaal .
12

de petrischaal Sluit na het intrekken van de lus. Vlam de lus en leg het opzij . Schakel de bunsenbrander .
Secundair Cultuur
13 Selecteer een kolonie bacteriën verder te isoleren .

Plaats de petrischaal in een incubator bij 30 graden Celsius gedurende 48 uur. Neem het uit en onderzoekt de agar voor de groei van bacteriële kolonies . Kies een kolonie die uniforme en discrete kijkt in totale uitstraling , een indicatie dat de kolonie is ontstaan ​​uit slechts een enkele bacterie . Cirkel de locatie van de kolonie op de achterkant van de onderkant deksel met de markeerstift .
14

Vlam de entnaald . Open de petrischaal en raak de enigszins afgekoelde loop naar het centrum van de kolonie .
15

Herhaal de stappen voor het maken van een T - strook op een nieuwe petrischaal met agar in de onderste deksel. Wanneer de strook wordt gemaakt en de petrischaal gesloten , schrijf de datum en het grondmonster werd het inoculum uit aan de onderzijde van het onderste deksel . Schakel de bunsenbrander .
16

Incubeer de petrischaal op 30 graden Celsius gedurende 48 uur. Onderzoek de kolonies die zijn gegroeid op de agar , op zoek naar uniformiteit van kleur , vorm en textuur . Herhaal de secundaire cultuur procedure als er geen kolonies die sterk afwijken in het uiterlijk van de anderen , wat aangeeft dat een enkele bacterie niet werd geïsoleerd .
17 Identieke ogende kolonies geven bacteriële isolement.

Koel de agar plaat die identiek lijkende kolonies bevat op het, met de uniformiteit die een goede indicatie dat slechts een enkele bacterie is geïsoleerd uit het bodemmonster .
18

andere tests voor Voer identificatie van de geïsoleerde bacterie indien gewenst, zoals gram vlekken , microscopisch onderzoek en cultuur op verschillende soorten agar .